试管婴儿之体外受精胚胎移植技术

时间:2017-10-09 01:21:47 来源:作者:点击:

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体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and enlbryo transfer,IVEET)技术是指将卵子取到体外,在实验室中,在培养皿中和受过处理的精液中的精子混合、相遇、结合,形成合子(如今日上午取出卵,下午和精子会合,明日上午在显微镜下可见含雄核和雌核两个核的合子,后天上午可见胚胎形成)。继续培养3天后,胚胎长大,含4个以上的分裂球。选择其中好的移植入宫腔。这是一种人工辅助生育技术,技术比较复杂,是否应该用于临,要考虑如下问题

1.适应证

(1)女方输卵管不通,精子卵子都好,但是碰不上。

(2)男方问题:即少、弱、无精症。精子卵子虽相遇,但精子却无能力钻入卵子,需用人工方法在显微镜下,将一个精子注射卵子的胞浆内(intracytoplasmic sperm injection,ICSD。

2.IVF-ET需要的条件

(1)女方有卵子卵巢内有卵泡。其证据是:①月经第二天,在基础状态下,B超可见卵巢内有卵泡;②FSH<10IU/ml。

(2)有精子来源,一般用淫取精液,且在此前已有6~8天内未取过精液;如精液中无精子,还要考虑从附睾或睾丸中取。

妊娠成功依靠两方面:①质量好的胚胎,这就意味着首先要有好的卵子和好的精子。②能够接受此胚胎的子宫内膜。两者必须同步,输卵管必须通畅。胚胎是由女方的卵子和男方的精子结合形成的。卵子有一个从不成熟成熟过程精子也有一个获得钻入卵子能力成长发育过程子宫内膜随着月经周期的改变,其形态和功能也会发生变化。女方不孕首先要分清是输卵管不通或是不排卵原因,还是子宫内膜不具有接受胚胎的能力

男方用淫法取出精液,精液放入消毒杯,在室温下液化30分钟,先做常规及精子活动检查

(1)用液化后的精液1ml加2ml精子洗液,混合。

(2)350g离心5~10分钟。

(3)吸出上清液并弃去,留下沉淀的精子

(4)清洗精子两次。

(5)向装有精子沉淀的试管中缓缓加入1ml精子洗液。

(6)将试管倾斜45°放入烧杯中,置于培养箱中,30分钟后吸取上方含上游活精子的液体0.5ml,放人另一试管中,同时将此部分进行化验,检查精子浓度及活动度。

正常精液的特征是:

(1)精液量2.0ml或更多,pH7.2或更高。

(2)精子密度20×10/ml,一次射精数量40×40°或更多。

(3)活力:射精后60分钟内大于70%或更多具前向速度,其中25%为速前进活动

(4)形态:15%或更多正常形态。

(5)存活率:50%或更多,即不着色。

(6)细胞<1×10/ml。

如果输卵管通畅的话,就不一定需要试管儿技术,还有更简单的辅助生育技术,如人工授精。如子宫液阻碍精液进入,则需用子宫腔内授精(intra uterine insemination,IUI),括精液预处理,即首先去除其精浆部分。因为精浆内含异,直接注入,将引起过敏反应处理的同时还可将良好的精子集中起来。

3.IVF-ET步骤

(1)开始,嘱患者月经周期第二天来门诊。

1)进行阴道检查子宫颈刮片细胞检查

2)阴道B超,转动探,在屏幕上看两侧卵巢上有几个小卵泡观察子宫内膜是否整齐。

3)同时取查FSH值。

正常育龄妇女,每侧卵巢应有4~6个小卵泡,在促排卵刺激激素作用下可长大成熟子宫内膜平整,无突出处,为正常。FSH值正常为3.2~10mlU/ml,如>10mIU/ml则预示卵泡对促激素反应不好,且小卵泡一定少。如卵巢为实,没有卵泡,FSH可达30~40mlU/ml或以上,为绝经期平,属卵巢早衰竭。取不出卵子,只能用赠卵进行IVF-ET。

(2)控制卵巢高度刺激(controlled ovarian hyperstimulation,COH)

正常情况下,育龄妇女每个月排一个卵。正常周期开始有多个小窦卵泡发育过程中,对同样的刺激,卵泡反应不一样,开始有多个长大,逐个萎缩,最后只有一个卵泡成熟排卵

在IVF-ET中为了多得几个卵子,可用物加强刺激,使多个卵泡不萎缩且继续长大。卵泡物的反应各不相同,各有其最低限,即阀值。不同,可有不同卵泡被动员。加大量,可促使更多卵泡长大、成熟。用FSH及hMG刺激那些阀值高的不能自然长大的卵泡,使它们也能发育。至于多少能发育长大,则决定于基础卵泡数及其质应

(3)常用物刺激方法1)阿拉瑞林150μg于M(M指月经周期的第几天)2、34、5、6、7每日一支,共6支。M8、9、10、11、12、13,每日半支,共3支,一共开9支(短方案)。

2)GonalF(果那芬),每支含FSH75IU,M3、M4、M5,共3天。上午2支,下午2支。

3)M8开始每日或隔日B超监测子宫内膜厚度,以及两侧卵巢卵泡发育情况

4)到M12~M13子宫内膜厚度应达到2cm,分几层,中间为宫腔,两侧为内膜及基底。

成熟卵泡直径达17~19mm,即将排卵,此时还出现LH峰,于当晚8时注射hCG10000IU36小时后,即后天上午取卵。如不及时取,卵泡将自主破裂。

(4)用改善

激素释放激素类似物或增强剂(gonadotrophin releasing hormone-analogue or agonist,GnRH-A)作用机制是:

1.与垂体上的受体结合,为刺激阶段清LH明显上升,FSH亦有上升。

2.受体用完,FSH、LH都降低,开始用时,促使垂体激素FSH、LH释放,以后垂体上的受体完全被占据,FSH、LH也被压抑,不会出现排卵前的自然LH峰,而只是在外用hCG后才出现,因此排卵时间可被控制。阿拉瑞林为常用的物。

应用GnRH-A有不同方案:长方案,于月经前7天开始;短方案月经周期第2天开始,随之hMG于周期第3天开始;超短方案只于月经周期3天应用。目前我们大都采用短方案国产阿拉瑞林150μg/支,每日皮下注射一支。M8开始阴道B超监测卵泡发育,适时注射hCG。

前一周期用妈富隆使月经准时来潮,即在前一周的第5天开始使用妈富隆,每日一片,共21天,停后2天来月经。可预测月经日期,从而制订刺激周期的计划

(5)阴道B超下取卵

卵泡中含卵冠丘复合物及颗粒细胞,在基底膜内。外面是卵泡内膜细胞,中有毛细管网。因此取卵时,针进入卵泡腔,并向四周转动(针上的螺纹可在B超屏幕上显示)。卵泡液开始色清亮,之后,基底膜破裂,变为,也意味着卵冠丘复合物已脱落,卵已被吸出,取卵成功。

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